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了解紫外可見分光光度計的設計與使用
更新時間:2024-06-06 點擊次數:852次
  一、引言
 
  紫外可見分光光度計,作為一種重要的分析儀器,被廣泛應用于化學、生物、環境等領域。它通過測量物質對紫外可見光的吸收特性,實現對物質的定性和定量分析。本文將詳細介紹紫外可見分光光度計的設計、原理與使用。
 
  二、紫外可見分光光度計的設計
 
  紫外可見分光光度計主要由光源、單色器、樣品池、檢測器和信號顯示系統五大部分組成。 
  1.光源:是提供符合要求的入射光的裝置,有熱輻射光源和氣體放電光源兩類。熱輻射光源用于可見光區,一般為鎢燈和鹵鎢燈;氣體放電光源用于紫外光區,一般為氫燈和氘燈。 
  2.單色器:功能是將光源產生的復合光分解為單色光和分出所需的單色光束,它是分光光度計的心臟部分。 
  3.樣品池:用于容納樣品,使光能夠充分與樣品接觸。 
  4.檢測器:用于測量透射光的強度,將其轉換成電信號輸出。 
  5.信號顯示系統:將檢測器輸出的電信號轉換成可讀的吸光度或透射率值,并顯示在屏幕上。
 
  三、紫外可見分光光度計的原理
 
  紫外可見分光光度計的原理主要基于比爾-朗伯定律和蘭伯特-比爾定律。比爾-朗伯定律是指溶液中溶質濃度與溶液對光的吸收成正比;蘭伯特-比爾定律是指光在透過介質時強度與介質厚度成指數關系。基于這兩個定律,紫外可見分光光度計利用光源發出一定波長的光,樣品吸收部分光線,其余光線通過樣品,最后通過檢測器測量透射光的強度,從而得到樣品對特定波長光的吸收情況。
 
  四、紫外可見分光光度計的使用
 
  1.開機:打開樣品室蓋,檢查樣品室中是否放置遮光物,若有取出。打開電源開關,儀器進入預熱狀態,預熱20分鐘。 
  2.選擇光源:電源開關打開后,鎢燈即亮;若需要在紫外光區工作,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(290nm~360nm)工作,則要同時點亮氘燈和鎢燈。 
  3.選擇波長:調節波長旋鈕或輸入實驗所需的波長,選擇須用的單色光波長。 
  4.校準:目前型號較新的分光光度計具有開機自動校準功能,無自動校準功能的設備使用前需參照使用說明書手動校準。 
  5.測量:如試驗方法中無特別規定,通常使用裝有蒸餾水的吸收池調零后放入樣品和參比樣進行測試,并記錄測試結果。 
  6.數據處理:定量測試時通常需要先測定若干個已知濃度的待測物標準樣品,根據其吸光值與濃度繪制標準曲線。目前新型號的紫外分光光度計本身都有制作和計算標準曲線的功能,具體操作方式可參照設備使用說明。不具備標準曲線繪制功能的設備,可利用Excel軟件或坐標紙輔助繪制。 
  7.關機:測量完畢,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。關閉電源,拔下電源插頭,在樣品室內放入干燥劑,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩。
 
  五、總結
 
  紫外可見分光光度計以其靈敏度高、分辨率高、操作簡便等特點,在化學、生物、環境等領域得到了廣泛的應用。通過了解其設計、原理與使用,我們可以更好地掌握這一分析儀器,為科學研究提供有力支持。
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